旋毛虫抗原的生化特性及猪旋毛虫病免疫方法的研究
时间:2022-11-23 19:14:44
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1.旋毛虫抗原的生化特性:首次应用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS―PAGE)、等电聚焦(1EF)、二维电泳及免疫印迹(EITB)等先进技术对4种旋毛虫抗原进行了分析。分析表明肌幼虫可溶性抗原至少含有糖蛋白、脂蛋白、糖脂蛋白、单纯蛋白、多糖及酯酶同工酶。二维电泳显示含有122个多肽斑点,其中大部分为分子量低于67KD的酸性多肽。肌幼虫排泄分泌(Es)抗原至少含有糖蛋白、脂蛋白、糖脂蛋白、单纯蛋白及多糖。二维电泳显示61个多肽斑点,大部分为分子量低于67KD的酸性多肽。成虫及新生幼虫可溶性抗原经SDS―PAGE后分别显示26及11条蛋白带。2.猪旋毛虫病免疫方法的研究:研究表明,7种抗原对小白鼠及猪均具有较好的免疫保护作用。其中以成虫可溶性抗原及灭活新生幼虫的免疫原性最好,在小白鼠可分别诱导产生95。6%及91.38%的免疫力(减虫率);在猪体可分别诱导产生98.21%及95.3%的免疫力;区域试验对猪体的保护率分别达75.26%及75.99%。免疫机制研究表明,猪免疫接种抗原后所诱导的免疫力不仅使虫体数量减少,而且使感染性减弱。免疫血清在体外可杀伤肌幼虫。免疫后血清抗体增加,外周血液中B淋巴细胞减少,T淋e细胞总数增加,其中抑制性T细胞增加较多,呈暂时的细胞免疫抑制现象。免疫持续期至少6个月。研究筛选出用白油一司班佐剂乳化7日龄成虫可溶性抗原,采用腹腔注射的免疫方法。初步研制出成虫可溶性抗原疫苗及灭活新生幼虫疫苗。关于旋毛虫抗原生化特性及猪旋毛虫病免疫方法的研究成果,阐明了4种抗原的部分生化特性;明确了?种抗原的免疫特性;筛选出了有效的免疫原及猪旋毛虫病免疫方法;初步研制出对猪具有很好保护作用的两种疫苗。本项成果填补了国内空白,达到国内领先水平及国际先进水平,具有重大学术意义及巨大的潜在应用前景。