一种高质量白菜黄化苗的培养方法

细胞质雄性不育（cytoplasmicmalesterility，CMS）广泛存在于高等植物中，它不仅在植物杂种优势利用方面具有重要价值，而且在研究核质互作方面具有重要的理论意义。其母性遗传的特点表明它可能同叶绿体或线粒体有关，现有的研究结果表明，大多数植物的CMS主要与线粒体有关。提取高质量的线粒体DNA（mitochondrialDNAmtDNA）是进行线粒体基因组研究的前提，而从健壮的黄化苗中提取mtDNA可以减少细胞质中叶绿体基因组的污染，从而更加严谨地分析线粒体基因组。本文以白菜为例介绍一种简单的高质量的黄化苗培养方法。首先采用0.1～0.2cm孔径的蛭石为基质，洗净后平铺于干净的育苗盘中，厚度约1cm。白菜种子浸种1～2h后播种，用种量约120g/平方米。播种后覆盖0.5cm的基质，轻轻压实。育苗盘置于暗室中，在昼/夜温为26℃/20℃下培养。每天喷水保持基质湿润，培养1周即可获得健壮黄化苗。因mtDNA的提取材料少，取材麻烦，工作量大，而采用0.1～0.2cm孔径的蛭石，通气性好，同时可以减少出苗时的“带帽率”及取材时苗根部沾染的基质量，这样就大大减少工作量，提高效率。播种量依不同作物有所不同，播种量太大容易导致苗徒长，瘦弱苗不利于mtDNA的提取，而播种太稀又影响到mtDNA的产量。培养中的变温处理可适当减轻黄化苗的徒长，而生长过程中的水分控制更是培养中的关键，每天喷水1次，基质保持湿润即可。试验证明，采用该方法培养1周即可获得黄化苗750g/平方米，可以提取到25μgmtDNA，而且其纯度较高，足以进行线粒体基因组的后续研究工作。